患者来源肿瘤类器官肿瘤类器官定义肿瘤组织细胞、肿瘤干细胞或肿瘤特异性细胞在特殊的培养微环境下形成具有与实体肿瘤类似的组织结构和功能的三维细胞集合体，包含自我更新和分化能力的干细胞，拥有原发肿瘤的基因谱系和病理特征，是肿瘤研究的新型体外模型。类器官技术实现了更加紧密的细胞与细胞间以及细胞与基质间的作用，可用于遗传发育、组织器官移植、疾病研究等多个生命学领域研究，是一种优秀的体外模型。肿瘤类器官的优点及发展历程(1)与体内实体瘤组织结构及功能类似；(2)高度保留肿瘤异质性；(3)利于高通量筛选；(4)便于基因操

细胞系构建细胞系（cell line）指原代细胞培养物经首次传代成功后所繁殖的细胞群体，也指可长期连续传代的培养细胞。耐药细胞系是通过模拟癌症患者在化疗期间所经历的条件而开发的，与亲代细胞系相比，耐药细胞系表现出2-8倍的抗性。稳转细胞系指的是基于某一细胞系构建的持续过表达或干扰某特定基因的细胞系，包括敲降（KD）细胞系、敲除（KO）细胞系、敲入（KI）细胞系。一、耐药细胞系构建1.实验原理细胞与低剂量的药物长期接触，引起细胞本身药物化学过程的改变，细胞膜上出现P-糖蛋白等耐药相关蛋白，使细胞逐渐对药物耐受。具有抗性

细胞染色细胞染色是一种通过化学或其他方法使细胞着色的技术，可直观的了解细胞生长状况、形态等细胞特性以及其中的分子表达水平与定位等，它包括细胞免疫化学染色、细胞免疫荧光染色、EdU/BrdU染色、TUNEL染色等。一、细胞免疫化学染色1．实验原理免疫细胞化学染色（Immunocytochemistry，ICC）原理是通过引入附有标记物的外源性抗体（或抗原），使之锚定与细胞标本中相应的抗原（或抗体）部位，标记物经呈色反应从而显示待检抗原（或抗体），根据标记物的不同分为：免疫酶细胞化学染色、免疫荧光细胞化学染色等。2．实验原理图3．实验步

细胞周期与凋亡检测细胞周期是指从一次细胞分裂形成子细胞开始到下一次细胞分裂形成子细胞为止所经历的过程，通常将子细胞形成作为一次细胞分裂结束的标志。细胞的生命开始于产生它的母细胞的分裂， 结束于它的子细胞的形成，或是细胞的自身死亡。细胞凋亡（Apoptosis），或者说程序性细胞死亡（Programmed cell death），是细胞内建的防御机制之一，在生物的正常发育及疾病抵御中起到重要的作用，涉及一系列基因的激活、表达以及调控，是细胞为更好地适应环境而主动争取的一种死亡过程。具体表现为：出芽形成凋亡小体、核小体间DNA的切割

细胞增殖细胞增殖（cell proliferation）是生物体生长、发育、繁殖以及遗传的基础，是生活细胞的重要生理功能之一，是生物体的重要生命特征。细胞增殖是评价细胞代谢、生理和病理状况的重要指标，常用的检测方法有BrdU染色、EdU染色和克隆形成等。一、Brdu/EdU染色1.实验原理BrdU（5-Bromo- 2’-deoxuuridine）是胸腺嘧啶的衍生物，可替代胸腺嘧啶选择性整合到新合成的DNA中（细胞周期S期）。这种掺入可以稳定存在，并随着DNA复制进入子细胞中。利用BrdU特异性抗体可以检测掺入的BrdU，进而判断细胞的增殖能力。EdU（5-Ethynyl-2'-deo

细胞迁移与细胞侵袭实验细胞迁移 (cell migration) 也称为细胞爬行、细胞移动或细胞运动，是指细胞在接收到迁移信号或感受到某些物质的梯度后而产生的定向移动，它是机体细胞的一种正常功能行为。而细胞侵袭（cell invasion）是指细胞通过细胞外基质从一个区域迁移到另一个区域的能力，常用来评估肿瘤细胞在正常组织中转移的能力，但正常细胞，如巨噬细胞也有相同的能力。分析细胞迁移或侵袭能力的常见方法有Transwell迁移、Transwell侵袭和细胞划痕。一、细胞划痕实验1．实验原理细胞划痕是较为简捷测定细胞迁移运动的方法，类似机体伤口

细胞活力检测细胞活力是一个群体中健康活细胞比例的指标，反映的是细胞健康的总体情况。细胞活力的测定旨在评估细胞的物理和代谢状态，以确定治疗或培养条件对细胞稳态的影响；通常采用CCK-8、MTT等方法进行检测。1．实验原理CCK-8是一种基于WST-8[2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑单钠盐]而广泛应用于测定细胞增殖或细胞毒性的一种高灵敏度、无放射性的比色检测方法。其原理是WST-8在电子载体作用下被细胞线粒体中的脱氢酶还原为具有高度水溶性的黄色甲瓒产物（Formazan dye），生成的甲瓒产物的数量与活